English
français
Deutsch
Español
русский
português
Лютеолин является естественным флавоноидным соединением, и ниже приведены некоторые распространенные методы обнаружения:
Высокоэффективная жидкостная хроматография основана на разнице в коэффициентах распределения различных веществ между стационарной фазой и подвижной фазой для разделения. Образец вводят в подвижную фазу (обычно растворитель или смешанный растворитель), которая переносит образец через хроматографическую колонку, заполненную неподвижной фазой (например, силикагелем). Различные соединения движутся с разной скоростью в колонне для достижения разделения. Наконец, лютеолин был обнаружен с помощью детекторов УФ Vis, поскольку он имеет специфическую длину волны поглощения УФ.
Подготовка образца: извлечение и растворение растительных экстрактов или других образцов, содержащих лютеолин, в соответствующих растворителях (таких как метанол, этанол и т. д.) и выполнение этапов предварительной обработки, таких как фильтрация и центрифугирование для удаления примесей.
Хроматографическая установка условия: Выберите соответствующую хроматографическую колонку (как хроматографическая колонка обратной фазы К18), и мобильная фаза может быть водой метанола или системой водоснабжения ацетонитрила. Добавьте соответствующее количество кислоты (как муравьиная кислота, фосфорная кислота) согласно реальной ситуации для того чтобы улучшить влияние разъединения. Расход потока обычно составляет 0,8-1,5 мл/мин, а температура колонны обычно устанавливается при комнатной температуре или при подходящей температуре постоянного (например, 30-40 ℃) по мере необходимости. Длина волны обнаружения вообще установлена на около 350нм, максимальной длине волны поглощения лутеолина.
-Впрыска и анализ: Впрысните обработанный образец в порт впрыски хроматографа, запишите хроматограмму через программное обеспечение компьютера, и выполните качественный и количественный анализ лютеолина основанный на времени пребывания и пиковой области.
Высокая эффективность разделения может эффективно разделятьЛютеолин оптом порошокОт других примесей в сложных образцах.
Высокая чувствительность обнаружения, способная обнаруживать низкие концентрации лютеолина.
Результаты точны, имеют хорошую воспроизводимость и подходят для количественного анализа.
Недостатки:
Инструменты и оборудование являются дорогостоящими и требуют профессиональных навыков обслуживания и эксплуатации.
Время анализа относительно большое, особенно для разделения сложных образцов.
Сочетание разделительной способности жидкостной хроматографии с высокой чувствительностью и селективностью масс-спектрометрии для идентификации. Образец сначала отделяется жидкостной хроматографией, а затем поступает в масс-спектрометр. Масс-спектрометр ионизирует молекулы и измеряет отношение массы к заряду (м/z) ионов для определения массы молекулы, тем самым идентифицируя лютеолин. Между тем, количественный анализ может быть проведен на основе силы ионов.
Претреатмент образца: Подобный ХПЛК, образцу нужно быть извлеченным и очищенным для того чтобы извлечь мешая вещества.
Установки параметра аппаратуры: Установки параметра для жидкостного раздела хроматографии по существу эти же как ХПЛК, но выбору мобильной фазы нужно рассматривать совместимость с масс-спектрометрией. Масс-спектрометру необходимо установить такие параметры, как режим ионизации (например, ионизация электрораспылением ESI или химическая ионизация APCI атмосферного давления), диапазон сканирования, режим обнаружения (режим положительных ионов или отрицательных ионов) и т. Д. Для лютеолина хорошие результаты обнаружения могут быть получены в режиме отрицательных ионов ESI.
Анализ и идентификация: Впрысните образец в аппаратуру, сперва отделите его жидкостной хроматографией, и после этого получите массовый спектр в масс-спектрометре. Путем сравнения с известными базами данных масс-спектрометрии магнолола и объединения такой информации, как время удерживания, определяют наличие магнолола, и проводят количественную оценку на основе интенсивности масс-спектрометрических пиков.
Он обладает высокой чувствительностью и селективностью и может точно определить структуру лютеолина.
Следовые количества лютеолина в сложных образцах также могут быть эффективнымиY обнаружен.
Недостатки:
Прибор имеет высокую стоимость и сложную эксплуатацию, требующую профессионального персонала для работы и анализа данных.
Анализ данных масс-спектрометрии требует определенного уровня профессиональных знаний и опыта.
Сопряженная система в молекулярной структуре лютеолина может поглощать определенные диапазоны длин волн ультрафиолетового видимого света. Согласно закону Ламберта Бера (A = ε bc, где A-поглощение, ε-молярная поглощающая способность, b-длина оптического пути, c-концентрация образца), в определенном диапазоне концентраций поглощение пропорционально концентрации лютеолина в образце. Содержание лютеолина может быть определено путем измерения абсорбции.
Стандартный чертеж кривой: Подготовьте серию стандартных решений различной концентрации используя известную концентрацию стандарта лютеолина, и измерьте абсорбанс на максимальной длине волны поглощения лютеолина (как 350 нм) используя УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫЙ видимый спектрофотометр. Нарисуйте стандартную кривую с концентрацией в качестве оси x и поглощением в качестве оси y.
Определение образца: Разбавьте выдержку образца теста соотвественно, измерьте абсорбансе на такой же длине волны, и высчитайте содержание лютеолина в образце основанном на стандартной кривой.
Прибор прост, прост в эксплуатации и экономичен.
Для образцов с высоким содержанием лютеолина может быть выполнено быстрое обнаружение.
Недостатки:
Плохая селективность и восприимчивость к помехам со стороны других веществ с аналогичными длинами волн поглощения в образце.
Нельзя эффективно различать лютеолин и его структурные аналоги.
Поместите образец на тонкослойную пластину, покрытую адсорбентом (таким как силикагель), и разработайте его на пластине, используя подходящий развивающий агент (такой как смешанный растворитель толуол-этилацетата муравьиной кислоты). Различные соединения обладают различными адсорбционными десорбционными способностями между адсорбентом и развивающимся агентом, таким образом, перемещая разные расстояния на тонкослойной пластине для достижения разделения. Экстракт османтуса может быть качественно проанализирован путем сравнения его значения Rf со стандартными образцами или частично количественно проанализирован по интенсивности пятен после цветовой реакции.
Подготовка или покупка доски тонкого слоя: Вы можете подготовить вашу собственную доску слоя силикона тонкую, или купить коммерчески доступные доски тонкого слоя.
Забор образца: Растворите образец в соотвествующем растворителе и используйте микросприц или капилляр для того чтобы запятнать образец на начальной линии плиты тонк-слоя.
Развертывание и развитие цвета: Поместите тонкослойную пластину в развивающийся цилиндр, содержащий развивающийся агент, и разверните его. После того, как передний край развивающего агента поднимется на определенное расстояние, снимите тонкослойную пластину и просушите ее на воздухе. Затем для развития цвета используются соответствующие цветные реагенты (такие как реагент трихлорида алюминия), и реакция между лютеолином и трихлоридом алюминия приведет к образованию флуоресцентных пятен под ультрафиолетовым светом. Положение и интенсивность пятна наблюдаются под ультрафиолетовым светом.
Оборудование простое, операция быстрая, а стоимость низкая.
Множественные образцы можно предварительно экранировать и отделять одновременно.
Недостатки:
Неточное количественное определение, главным образом используемое для качественного или полу количественного анализа.
Эффект разделения является относительно слабым, и может быть невозможно полностью отделить лютеолин и другие компоненты от сложных образцов.
